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https://rinacional.tecnm.mx/jspui/handle/TecNM/6051| Title: | MICROPROPAGACIÓN in vitro Y TRANSFORMACIÓN GENÉTICA DE Heliopsis longipes PARA LA PRODUCCIÓN DE AFININA |
| Authors: | GONZÁLEZ CASTAÑEDA, JOSÉ MANUEL |
| Issue Date: | 2018-04-01 |
| Publisher: | Tecnológico Nacional de México |
| metadata.dc.publisher.tecnm: | Instituto Tecnológico de Tlajomulco |
| Description: | Heliopsis longipes (Asterácea) es la planta con mayor importancia económica dentro de su género, debido a que sus extractos presentan propiedades bactericidas, fungicidas, anestésicas, antimutagénicas, anticonceptivas entre otras. La mayoría de las características anteriormente mencionadas las confieren un grupo de metabolitos secundarios denominados alcamidas, siendo la afinina el compuesto más abundante, encontrado principalmente en las raíces de H. longipes. Debido al gran potencial biotecnológico de este modelo vegetal, en este trabajo se desarrolló un protocolo para su micropropagación in vitro, y se inició con su transformación genética mediada por Agrobacterium rhizogenes. Para su micropropagación se utilizaron segmentos nodales provenientes de plantas madre y se emplearon diferentes concentraciones y combinaciones de reguladores de crecimiento en medio MS al 50% (0.5X). El mayor número de brotes por explante se obtuvo empleando una concentración de BAP de 0.03 mg/L generándose 6.12 y 11.5 brotes en promedio por explante para medio sólido y líquido respectivamente. El mejor tratamiento para la formación de callo fue el medio MS con 1 mg/L de ANA con hasta 75% de explantes con desorganización celular. Para la formación de raíces, las hojas tratadas con 1 mg/L de ANA mostraron 2.55 raíces por explante y un 50% de explantes con raíz. También los segmentos nodales tratados con 0.06 mg/L de AIA mostraron tres raíces promedio por explante con presencia de raíz del 100%, así mismo el tratamiento con 12 g/L de agar mostró 2.12 raíces promedio por explante y un 100% de segmentos nodales con presencia de raíz. La trasformación genética tuvo un éxito de cuatro por ciento con el uso de la cepa silvestre de A. rhizogenes ATTCC15834, sin embargo, las raíces obtenidas no tuvieron desarrollo en el medio sin reguladores de crecimiento. El mejor antibiótico para la eliminación de bacteria fue cefotaxima 500 mg/L. Solo las hojas pudieron ser transformadas y el tratamiento de explantes con 0.03 mg/L de BAP previo a la infección de A. rhizogenes mostró un aumento en la formación de callo de los explantes tratados. |
| metadata.dc.type: | info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Appears in Collections: | Maestria en Ciencias en Agrobiotecnología |
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